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超微量核酸蛋白分析儀的使用誤區(qū)
點擊次數(shù):3391 發(fā)布時間:2018/12/4 16:08:42

超微量核酸蛋白分析儀是一款檢測DNA,RNA濃度和純度的儀器,能夠快速測量核酸的濃度。每次測量所需要的樣品量僅需0.5至2ul即可。直接將樣品點于樣板上。無需比色杯或毛細(xì)管等附件。測量結(jié)束后,可以選擇直接將樣品擦去或者再用移液器回收樣品。

超微量核酸蛋白分析儀的使用誤區(qū):
  1)測量核酸時發(fā)現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn):首先要確定核酸樣品的純度,如果是DNA樣品,260/280比值應(yīng)該在1.6-2.0之間。比值小于1.6說明有蛋白類物質(zhì)的干擾,大于2.0說明有 RNA的干擾。如果是RNA樣品,260/280應(yīng)該大于2.0,如果值偏高如2.5以上,可能是RNA降解的原因,如果小于2.0說明有蛋白類物質(zhì)的干擾。還可以通過230nm、和320nm處的吸收峰來判斷樣品的純度,230表示存在以下污染物如:碳水化合物、多肽、苯酚等,核酸和蛋白在320nm處的吸收峰幾乎為零,所以如果有吸收說明有雜質(zhì),可能是稠環(huán)芳香有機(jī)試劑的污染。

  2)適合測量純度高的蛋白樣品,不能測量含有雜質(zhì)的蛋白樣品:通過上面的公式我們能夠發(fā)現(xiàn),c值是與吸光度A成正比的,如果樣品中含有雜質(zhì)成分,且雜質(zhì)在280處有吸收峰的話就會造成測量值不準(zhǔn),一般我們提蛋白過程中使用的有機(jī)試劑如果殘留的話就會造成測量蛋白值不準(zhǔn)的情況。

  3)測量兩個樣品中間務(wù)必要用吸水的面巾紙和蒸餾水清潔測量臂:如果不做清潔,殘留的樣品會對后來樣品的測量造成影響。切記不要用擦鏡紙擦拭,因為擦鏡紙不吸水。

  4)測量同一個樣品的時間不宜過長:因為上樣量很少,隨著時間的推遲樣品會有所蒸發(fā),造成測量出來的濃度有誤差。

  5)如果測量值不是很準(zhǔn),建議可以把樣品稀釋到適當(dāng)濃度再進(jìn)行測量。

  6)如果感覺機(jī)器的平衡性不好,可以通過以下方法檢測:以空氣為blank,反復(fù)測量空氣,兩次測量之間間隔5秒,測出的吸光度值應(yīng)該小于0.04,說明平衡性良好。